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Título : Obtención del péptido antimicrobiano aedesina por medio de un sistema de autoescisión mediado por inteina, utilizando un sistema de expresión en Escherichia coli BL21 (DE3)
Autor : García Solís, Mario Daniel
Mejía Bonilla, Dimitri Serge
Palabras clave : BIOINFORMÁTICA
ACTIVIDAD ANTIMICROBIANA
PÉPTIDOS ANTIMICROBIANOS
AEDESINA
INTEINA
ESCHERICHIA COLI
Fecha de publicación : sep-2023
Editorial : Universidad Técnica de Ambato. Facultad de Ciencia e Ingeniería en Alimentos y Biotecnología. Carrera de Biotecnología
Resumen : Antibiotics have significantly improved people's lifestyle since their implementation. However, at present, the indiscriminate use of these drugs has generated a health crisis due to antimicrobial resistance. The current trend shows an increase in the number of resistant strains that cannot be treated with conventional antibiotics, which has led to the need to develop a new generation of antibiotics. One of the most promising alternatives is the application of antimicrobial peptides, among which aedesin stands out. The present research project focuses on the implementation of a purification strategy for aedesin. This strategy consists of an intein-mediated self-cleavable system, which possesses a prohibition condition that disables self-cleavage in the presence of high salt concentrations. A heterologous system of synthesis in E. coli BL21 was used for expression. In conclusion, synthesis in bacteria offers several advantages compared to other methods of obtaining peptides. Furthermore, the strategy used for the purification of aedesin has proven to be effective. However, there are still challenges to be overcome, such as peptide toxicity and basal expression. Despite these drawbacks, the successful expression and purification of aedesin position it as an interesting candidate for analysis in future clinical studies.
Descripción : Los antibióticos han mejorado significativamente el estilo de vida de las personas desde su implementación. No obstante, en la actualidad, el uso indiscriminado de estos medicamentos ha generado una crisis sanitaria debido a la resistencia antimicrobiana. La tendencia actual muestra un aumento en la cantidad de cepas resistentes que no pueden ser tratadas con los antibióticos convencionales, lo que ha llevado a la necesidad de desarrollar una nueva generación de antibióticos. Una de las alternativas más prometedoras es la aplicación de péptidos antimicrobianos, entre los cuales destaca la aedesina. El presente proyecto de investigación se centra en la implementación de una estrategia de purificación para la aedesina. Esta estrategia consiste en un sistema autoescindible mediado por inteína, el cual posee una condición de prohibición que inhabilita el autocorte en presencia de altas concentraciones de sal. Para la expresión se usó un sistema heterólogo de síntesis en E. coli BL21. En conclusión, la síntesis en bacterias ofrece varias ventajas en comparación con otros métodos de obtención de péptidos. Además, la estrategia utilizada para la purificación de la aedesina ha demostrado ser efectiva. Sin embargo, todavía existen desafíos que deben superarse, como la toxicidad del péptido y la expresión basal. A pesar de estos inconvenientes, la exitosa expresión y purificación de la aedesina la posicionan como un candidato interesante para su análisis en estudios clínicos futuros.
URI : https://repositorio.uta.edu.ec/jspui/handle/123456789/39300
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