Optimización del protocolo para la fase de introducción in vitro de la flor del Ranúnculo Persa (Ranunculus asiaticus) en la empresa LEPLANTEC S.A.
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Date
2024-08
Authors
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Publisher
Universidad Técnica de Ambato. Facultad de Ciencia e Ingeniería en Alimentos y Biotecnología. Carrera de Biotecnología
Abstract
The optimization of the protocol for the in vitro introduction phase of the Persian Buttercup (R. asiaticus) was conducted in collaboration with LEPLANTEC S.A., where the first stage of in vitro plant micropropagation was analyzed due to its high endogenous and exogenous contamination. The objective was to improve the standardized culture medium protocol through combined treatments. Bulbs of the flower were collected to evaluate two concentrations of sodium hypochlorite, determining that the 2% concentration presented a low percentage of shoots with total oxidation, although without significant difference from the 1.5% concentration. Antibiotics were directly applied to the shoots during planting, with gentamicin showing the lowest incidence percentage. The effectiveness of Plant Preservative Mixture as a bacteriostatic agent was measured, with the 1 ml concentration being the most effective. Finally, the best concentration of the hormones BAP and ANA was determined, with the 1 ml concentration being optimal as it promoted adequate shoot growth in this initial stage. The combined treatment D2P1A1H2 was the most effective, identified through a factorial design, showing the highest percentage of shoot viability, achieving a high degree of viability and proper development of the Persian Buttercup shoots. This research allowed the identification and optimization of the critical components of the in vitro micropropagation protocol for the Persian Buttercup, significantly improving the process efficiency and establishing a more robust protocol for the investigative purposes of LEPLANTEC S.A.
Description
La optimización del protocolo de la fase de introducción in vitro de la flor Ranúnculo Persa (R. asiaticus), se realizó en colaboración con la empresa LEPLANTEC S.A., donde se analizó la primera etapa de la micropropagación vegetal in vitro de la planta por su alta contaminación endógena y exógena, con el objetivo de mejorar el protocolo del medio de cultivo estandarizado mediante tratamientos combinados. Se recolectaron bulbos de la flor para evaluar dos concentraciones de hipoclorito de sodio, determinándose que la de 2 por ciento presentó un bajo porcentaje de brotes con oxidación total, aunque sin diferencia significativa con el 1.5 por ciento. Los antibióticos se suministraron directamente en los brotes durante la siembra, la gentamicina presentó el menor porcentaje de incidencia. Se midió la efectividad del Plant Perservative Mixture como bacteriostático, siendo la de 1 ml la más eficaz. Finalmente, la mejor concentración de las hormonas BAP y ANA, donde la de 1 ml fue la óptima, ya que promovió un crecimiento adecuado del brote en esta primera etapa. El tratamiento combinado D2P1A1H2 fue el más efectivo, se identificó mediante un diseño factorial, y mostró el mayor porcentaje de viabilidad de brotes de la flor, logrando un alto grado de viabilidad y desarrollo adecuado de los brotes del Ranúnculo Persa. La investigación permitió identificar y optimizar los componentes críticos del protocolo de micropropagación in vitro para el Ranúnculo Persa, mejorando significativamente la eficiencia del proceso y estableciendo un protocolo más robusto para fines investigativos de la empresa LEPLANTEC S.A.
Keywords
BIOTECNOLOGÍA VEGETAL, MICROPROPAGACIÓN VEGETAL, CULTIVO IN VITRO, TEJIDOS VEGETALES, FITIHORMONAS, RANÚNCULO PERSA, LEPLANTEC S.A.