Detección de genes AVR y ECP en aislados de Cladosporium fulvum Cooke. del cantón Tisaleo

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2025-08

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Abstract

Leaf mold is a disease caused by the biotrophic fungus Cladosporium fulvum Cooke in kidney tomato (Solanum lycopersicum L.) crops. Tomato plants possess resistance (R) genes that trigger a hypersensitive response (HR) upon detecting an avirulence (Avr) gene or extracellular protein (Ecp) gene from C. fulvum. The objective of this study was to detect the presence or absence of Avr and Ecp genes in 10 monosporic isolates from Tisaleo Canton by standardizing protocols for mycelial reactivation, DNA extraction, and endpoint PCR. The following annealing temperatures were used: 58°C, 61°C, 64°C, 59°C, 63°C, 60°C, 58°C, and 55°C for the genes Avr2, Avr4, Avr4-E, Avr9, Ecp1, Ecp2, Ecp4, and Ecp5, respectively. The amplified product was loaded onto a 1% agarose gel and subjected to electrophoresis at 100V for 45 minutes. The results were visualized under UV light using a transilluminator.It was determined that all isolates from Tisaleo exclusively contained the Avr2 gene, along with Ecp1 and Ecp2. This study constitutes the first report on the presence of Avr and Ecp genes in C. fulvum isolates from Tisaleo, Tungurahua Province.

Description

El moho gris de la hoja es una enfermedad causada por el hongo biotrófico Cladosporium fulvum Cooke. en el cultivo del tomate riñón (Solanum lycopersicum L.), el tomate posee genes de resistencia R que al detectar un gen de avirulencia (Avr) o genes de proteínas extracelulares (Ecp) de C. fulvum manda una respuesta de hipersensibilidad (HR). El objetivo de esta investigación fue detectar la presencia o ausencia de los genes Avr y Ecp en 10 aislados monospóricos del cantón Tisaleo mediante la estandarización de los protocolos para la reactivación del crecimiento del micelio, extracción de ADN y PCR tiempo final usando las siguientes condiciones de anillamiento 58°C, 61°C, 64°C, 59°C, 63°C, 60°C, 58°C y 55°C para los genes Avr2, Avr4, Avr4-E, Avr9, Ecp1, Ecp2, Ecp4 y Ecp5 en ese orden. El producto amplificado se colocó en un gel de agarosa al 1% y se sometió a electroforesis a 100V por 45 minutos, se visualizó los resultados en un transiluminador mediante luz UV. Se determinó que los aislados pertenecientes al cantón Tisaleo tienen la presencia única del gen Avr2 y de los genes Ecp1 y Ecp2. Este trabajo constituye el primer informe sobre la presencia de genes Avr y Ecp en aislados de C. fulvum en el cantón Tisaleo de la provincia de Tungurahua.

Keywords

AVIRULENCIA, PCR, C. FULVUM, TOMATE RIÑÓN

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