Evaluar las técnicas de resuspencion espermática sobre la calidad post descongelado de semen equino de diferentes razas
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Date
2025-02
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Abstract
The cryopreservation of equine semen is a key tool in assisted reproduction, as it
allows the preservation of genetic material from high-value horses and optimizes
artificial insemination programs. However, one of the main challenges of this process
is the decrease in sperm viability and functionality post-thaw, due to osmotic, thermal,
mechanical, and oxidative stress factors that affect the structural and functional
integrity of sperm.
The objective of this study was to evaluate the effect of different sperm resuspension
techniques on the post-thaw quality of equine semen in three breeds: Arabian,
Colombian Criollo, and Spanish. Three treatments were analyzed:
1. Conventional method without centrifugation (control).
2. Sperm resuspension at 1500 rpm for 10 minutes.
3. Sperm resuspension at 1700 rpm for 10 minutes.
Key seminal parameters were evaluated, such as sperm concentration, motility, vigor,
morphology, and membrane and acrosome integrity, using specialized laboratory tests.
The results indicated that the application of sperm resuspension techniques
significantly improved the quality of post-thaw equine semen compared to the
conventional method. It was found that sperm subjected to resuspension at 1500 rpm
maintained significantly higher motility (above 70%) compared to semen treated with
the conventional method, where motility decreased to values below 50%. The 1700
rpm technique also improved sperm motility, although to a lesser extent than the 1500
rpm technique, possibly due to an increase in mechanical stress.
Regarding sperm morphology, sperm treated with resuspension showed fewer
structural alterations compared to those in the conventional method. In particular, the
resuspension at 1500 rpm reduced the incidence of abnormalities in the head and tail
of sperm, suggesting less damage from the freezing-thawing process.
Membrane integrity analysis through the HOST (Hypoosmotic Swelling Test)
revealed that sperm subjected to resuspension showed a better osmotic response,
indicating greater functionality of the plasma membrane. In the conventional method,
membrane integrity decreased to values near 45%, while in the samples subjected to
resuspension at 1500 rpm, it remained above 65%, showing greater cellular protection. On the other hand, acrosomal integrity analysis indicated that resuspension treatments
reduced the percentage of sperm with damage to this structure, suggesting a higher
fertilizing capacity compared to the conventional method.
From a comparative approach between breeds, it was observed that Colombian Criollo
and Spanish horses showed a better response to resuspension techniques, with greater
preservation of motility and sperm viability post-thaw. In contrast, sperm from
Arabian horses were more sensitive to centrifugation changes, showing a slight
decrease in motility with the 1700 rpm technique, suggesting that the intensity of the
procedure should be adjusted according to breed and semen characteristics.
Overall, the findings of this study confirm that the implementation of sperm
resuspension techniques optimizes the post-thaw quality of equine semen by reducing
the negative effects of the cryopreservation process. This represents a significant
advance in improving the efficiency of assisted reproduction programs in the equine
industry, increasing the success rates of artificial insemination and the preservation of
valuable genetic lines.
Description
La criopreservación del semen equino es una herramienta clave en la reproducción
asistida, ya que permite la conservación del material genético de caballos de alto valor y
la optimización de los programas de inseminación artificial. Sin embargo, uno de los
principales desafíos de este proceso es la disminución de la viabilidad y funcionalidad
espermática post descongelación, debido a factores de estrés osmótico, térmico, mecánico
y oxidativo, que afectan la integridad estructural y funcional de los espermatozoides.
El presente estudio tuvo como objetivo evaluar el efecto de diferentes técnicas de
resuspensión espermática en la calidad post descongelación del semen equino en tres
razas: Árabe, Criollo Colombiano y Español. Para ello, se analizaron tres tratamientos:
1. Método convencional sin centrifugación (testigo).
2. Resuspensión espermática a 1500 rpm durante 10 minutos.
3. Resuspensión espermática a 1700 rpm durante 10 minutos.
Se evaluaron parámetros seminales clave, como la concentración espermática, movilidad,
vigor, morfología e integridad de la membrana y del acrosoma, mediante pruebas
especializadas en laboratorio.
Los resultados indicaron que la aplicación de técnicas de resuspensión espermática mejora
significativamente la calidad del semen equino post descongelado en comparación con el
método convencional. Se evidenció que los espermatozoides sometidos a resuspensión a
1500 rpm conservaron una motilidad significativamente mayor (superior al 70%) en
comparación con el semen tratado con el método convencional, donde la motilidad se
redujo a valores inferiores al 50%. La técnica a 1700 rpm también mejoró la motilidad
espermática, aunque en menor medida que la de 1500 rpm, posiblemente debido a un
incremento en el estrés mecánico.
En cuanto a la morfología espermática, los espermatozoides tratados con resuspensión
presentaron menores alteraciones estructurales en comparación con los del método
convencional. En particular, la resuspensión a 1500 rpm redujo la incidencia de
anormalidades en la cabeza y en la cola de los espermatozoides, lo que sugiere una menor
afectación por el proceso de congelación-descongelación. Los análisis de integridad de membrana a través del test de HOST (Hypoosmotic Swelling
Test) revelaron que los espermatozoides sometidos a resuspensión mostraron una mejor respuesta osmótica, lo que indica una mayor funcionalidad de la membrana plasmática.
En el método convencional, la integridad de la membrana se redujo a valores cercanos al
45%, mientras que en las muestras sometidas a resuspensión a 1500 rpm se mantuvo por
encima del 65%, evidenciando una mayor protección celular.
Por otro lado, el análisis de la integridad del acrosoma indicó que los tratamientos con
resuspensión disminuyeron el porcentaje de espermatozoides con daños en esta estructura,
lo que sugiere una mayor capacidad de fecundación en comparación con el método
convencional.
Desde un enfoque comparativo entre razas, se observó que los caballos Criollo
Colombiano y Español mostraron una mejor respuesta a las técnicas de resuspensión, con
una mayor conservación de la motilidad y viabilidad espermática post descongelación. En
cambio, los espermatozoides de caballos Árabes fueron más sensibles a los cambios en la
centrifugación, presentando una ligera disminución en la motilidad en la técnica de 1700
rpm, lo que sugiere que la intensidad del procedimiento debe ajustarse según la raza y
características del semen.
En general, los hallazgos de este estudio confirman que la implementación de técnicas de
resuspensión espermática optimiza la calidad del semen equino post descongelación, al
reducir los efectos negativos del proceso de criopreservación. Esto representa un avance
significativo para mejorar la eficiencia de los programas de reproducción asistida en la
industria equina, aumentando las probabilidades de éxito en la inseminación artificial y la
conservación de líneas genéticas valiosas.
Keywords
MEDICINA VETERINARIA, VETERINARIA, TÉCNICAS DE RESUSPENCIÓN ESPERMÁTICA, SEMEN EQUINO, SEMEN, EQUINO, SEMEN EQUINO DESCONGELADO