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Título : Caracterización molecular de genes de avirulencia del agente causal del moho gris de la hoja de Solanum lycopersicum L en la provincia de Tungurahua
Autor : León Gordón, Olguer Alfredo
Flores Yanchaliquin, Diana Carolina
Palabras clave : AGRONOMIA
Solanum lycopersicum L
GENES DE AVIRULENCIA
GENES
AVIRULENCIA
CARACTERIZACIÓN MOLECULAR
MOHO GRIS
MOHO
HOJA DE SOLANUM
Fecha de publicación : ago-2022
Resumen : Cladosporium fulvum or leaf mold is a pathogen described by Cooke in 1883 that develops easily in tomato crops due to favorable temperature and humidity conditions. For the present investigation, the objective was to "Molecularly characterize avirulence genes of the causal agent of the mold of the leaves of Solanumlycopersicum L in the province of Tungurahua". For the molecular characterization of genes, fungal DNA was extracted from each canton (Ambato, Baños, Cevallos, Mocha, Patate, Pelileo, Píllaro, Tisaleo), which consisted of lyophilizing the mycelium, crushing and placing the respective buffers (Buffer A Naoh + Tween 20 and Buffer B Tris Hcl + Edta) and the extracted DNA was stored at -20°C. For amplification using conventional PCR, the amplification conditions for each Avr andEcp and their process were standardized, using dNTPs, Taq DNA Polymerase,forwrad-reverse primers, and ultrapure water with 25 μl of reaction. For visualization,1% agarose gels were made with the running buffer TAE 1X and a 100bp molecular marker (Invitogen) was used. Having as results the presence of the Avr2 and Avr4E avirulence gene, thus also verifying the absence of Avr4 and Avr9, while for extracellular proteins Ecp2, Ecp4 and Ecp5 are presented so that for Ecp1 it does notrecognize the presence of the gene
Descripción : Cladosporium fulvum o moho de la hoja es un patógeno descrito por Cooke en el año de 1883, desarrollandose en el cultivo de tomate con gran facilidad debido a condiciones favorables de temperatura y humedad. Para la presente investigación se tuvo como objetivo “Caracterizar molecularmente genes de avirulencia del agente causal del moho de las hojas de Solanum lycopersicum L en la provincia de Tungurahua”. Para la caracterización molecular de genes se procedió con la extracción del ADN fúngico de cada cantón (Ambato, Baños, Cevallos, Mocha, Patate, Pelileo, Píllaro y Tisaleo) que consistió en liofilizar el micelio, triturar y colocarlos respectivos tampones (Tampón A Naoh + Tween 20 y Tampón B Tris Hcl + Edta) y se conservó el ADN extraído a -20°C. Para la amplificación mediante el PCR convencional se estandarizaron las condiciones de amplificación para cada Avr y Ecp y su proceso en el que se utilizó dNTPs, Taq DNA Polymerase, primers forwrad- reverse, agua ultrapura teniendo 25 μl de reacción. Para la visualización se realizaron geles al 1% de agarosa con el buffer de corrida TAE 1X y se utilizó un marcador molecular de 100bp (Invitogen). Teniendo como resultados la presencia del gen de avirulencia Avr2 y Avr4E constatando así también la ausencia del Avr4 y Avr9, mientras que para las proteínas extracelulares se presenta el Ecp2, Ecp4 y Ecp5 de modo que para Ecp1 no reconoce presencia del gen.
URI : https://repositorio.uta.edu.ec/jspui/handle/123456789/36063
Aparece en las colecciones: Tesis Ingeniería Agronómica

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